Extractos de plantas medicinales de la provincia de Misiones. Evaluación de su potencial para control de Muscardina blanca en el gusano de seda (Bombyx mori L.)

Abstract

La muerte de los gusanos de seda (Bombyx mori) genera importantes pérdidas económicas en los sericicultores de todo el mundo. Los métodos tradicionales para el control o prevención de la muscardina blanca, causada por Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill., no son eficientes. Los componentes con actividad antifúngica de extractos de plantas medicinales, presentan potencial en las acciones contra los microorganismos patógenos. El objetivo de este trabajo fue probar extractos hídricos e hidroalcoholicos de plantas medicinales nativas de Misiones como antifúngicos contra B. bassiana que ocasiona la enfermedad muscardina blanca. Primeramente se realizó el tratamiento in vitro, con extractos de Aristoloquia argentina, Amaranthus espinosus, Baccharis crispa, Mikania cordifolia. Pityrogramma calomelanos, Polygonum punctatum y Schinus molle desde 2 a 8% y se ensayaron sobre parámetros de B. bassiana para determinar el nivel de toxicidad, a través del resultado de Índice Biológico obtenido (IB). Los valores de IB indicaron que A. argentina 6%, A. espinosus 4%, B. crispa 4 y 6%, M. cordifolia 6%, P. calomelanos 4% y P. punctatum 6 y 8% resultaron con actividad antifúngicos ubicándolos en el rango de “Tóxicos” para el hongo. En segunda instancia, se realizaron bioensayos mediante tratamiento preventivo y curativo para muscardina blanca en B. mori, previa evaluación de los extractos sobre los parámetros biológicos de los gusanos. En el tratamiento preventivo las larvas fueron alimentadas con hojas de mora rociadas con los extractos y luego se les inoculo el hongo (4 ml) por inmersión, con una concentración de 5 × 107 conidios/ml. En el tratamiento curativo el extracto se roció directamente sobre las larvas seis horas después de la inoculación de B. bassiana. Los extractos se suministraron en 1 dosis diaria por cuatro días consecutivos, por la mañana. Como última etapa se realizó la caracterización fitoquímica. P. calomelanos 4% fue el que obtuvo la mayor capacidad antioxidante (IC50 10,30 μg/ml), contenido de fenoles, taninos totales y flavonoides. P. punctatum y M. cordifolia obtuvieron resultados similares con respecto a estos componentes. Los resultados permiten concluir que, in vitro, todos los extractos tuvieron actividad frente a los parámetros medidos, sin embargo, en los bioensayos, M. cordifolia 6% fue el que mejor se comportó, con 84% de formación de capullos y presentó actividad antifúngica en el tratamiento curativo contra muscardina. Estos resultados podrían indicar que, en el extracto hidroalcoholico elaborado para esta planta, al 6%, el componente bioactivo antifúngico se logró extraer en mayor cantidad que en el extracto de P. calomelanos y P. punctatum, con potencial para ser utilizado para contrarrestar la enfermedad, muscardina en B. mori.

The death of silkworms (Bombyx mori) generates significant economic losses for sericulturists around the world. Traditional methods for the control or prevention of white muscardine, caused by Beauveria bassiana (Bals.-Criv.) Vuill are not efficient. The components with antifungal activity, obtained from extracts of medicinal plants, have potential in actions against pathogenic microorganisms. The objective of this work was to test hydric and hydroalcoholic extracts of medicinal plants native to Misiones as antifungals against B. bassiana, in white muscardine disease. In the first stage, the invitro treatment was carried out, with extracts of Aristoloquia argentina, Amaranthus espinosus, Baccharis crispa, Mikania cordifolia. Pityrogramma calomelanos, Polygonum punctatum and Schinus molle, from 2 to 8% and they were tested on B. bassiana parameters to determine the level of toxicity, through the result of the Biological Index obtained (BI). The BI values indicated that A. argentina 6%, A. espinosus 4%, B. crispa 4 and 6%, M. cordifolia 6%, P. calomeanos 4% and P. punctatum 6 and 8% had antifungal activity, placing them in the range of "Toxic" for the fungus. In the second instance, bioassays were carried out using a preventive and a curative treatment for white muscardine in B. mori, after evaluating the extracts on the biological parameters of the worms. In the preventive treatment, the extract was sprayed on the blackberry leaves and then the fungus (4 ml) was inoculated by immersion, with a concentration of 5 × 107 conidia/ml. In the curative treatment, the extract was sprayed directly on the larvae six hours after the inoculation of B. bassiana. The extracts were supplied in 1 daily dose on four consecutive days, in the morning. As a last stage, the extracts selected for their fungal activity were phytochemically characterized. P. calomelanos 4% was the one that obtained the highest antioxidant capacity (IC50 10.30 μg/ml), content of phenols, total tannins and flavonoids. P. punctatum and M. cordifolia obtained similar results regarding these components. The results allow us to conclude that, in vitro, all the extracts had activity against the measured parameters, however, in the bioassays, M. cordifolia 6% was the one that best behaved, with 84% of cocoon formation and presented antifungal activity in curative treatment against muscardine. These results could indicate that, in the hydroalcoholic extract prepared for this plant, at 6%, the bioactive antifungal component was extracted in greater quantity than in the extract of P. calomelanos and P. punctatum, with the potential to be used to counteract the disease, muscardine in B. mori.